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人臍帶間充質(zhi)干細(xi)胞

Human umbilical cord mesenchymal stem cells

產品貨號：JY02066  規(gui)格：1×10? cells（T25瓶/1mL凍(dong)存管）銷售價格：￥3000

人臍帶間充質(zhi)干細胞 說明書.pdf

細胞簡介

臍帶間充質干(gan)細胞（Umbilical cord mesenchymal stem cells，UC-MSCs）是指(zhi)存(cun)在(zai)于新生兒臍(qi)帶(dai)組織中的(de)一種多(duo)功能(neng)干(gan)細(xi)胞，廣(guang)泛應(ying)用于組織工(gong)程，細(xi)胞治(zhi)療和基因治(zhi)療。江苑生物人臍(qi)帶(dai)間質(zhi)干(gan)細(xi)胞取(qu)自健康足月分(fen)娩孕(yun)婦的(de)臍(qi)帶(dai)，擁有強大的(de)自我更新能(neng)力并(bing)具有多(duo)向分(fen)化潛能(neng)。

間(jian)充質(zhi)(zhi)干細(xi)胞(bao)是干細(xi)胞(bao)的一種，因能分化為(wei)間(jian)質(zhi)(zhi)組織(zhi)而得名(ming)，具有亞全能分化潛能，在特定的體(ti)內外環境下，能夠誘(you)導(dao)分化成(cheng)為(wei)多種組織(zhi)細(xi)胞(bao)，例如神經、心臟、肝(gan)臟、骨(gu)(gu)、軟骨(gu)(gu)、肌腱、脂(zhi)肪(fang)、上皮等細(xi)胞(bao)。間(jian)充質(zhi)(zhi)干細(xi)胞(bao)廣泛分布于胎兒和成(cheng)體(ti)的骨(gu)(gu)髓、骨(gu)(gu)膜、松(song)骨(gu)(gu)質(zhi)(zhi)、脂(zhi)肪(fang)、滑膜、骨(gu)(gu)骼肌、胎肝(gan)、乳牙、臍(qi)(qi)(qi)帶(dai)、臍(qi)(qi)(qi)帶(dai)血中，其中臍(qi)(qi)(qi)帶(dai)來(lai)源的間(jian)充質(zhi)(zhi)干細(xi)胞(bao)質(zhi)(zhi)量(liang)高、純凈(jing)、數量(liang)多。

間充質(zhi)干(gan)細胞除了具有強大的增殖能力和多向分化潛能，還(huan)具有免疫(yi)調節功能，通(tong)過細胞間的相互作(zuo)用(yong)及產生細胞因子抑制T細(xi)(xi)胞的(de)增殖及其免疫反應，從而重(zhong)塑免疫環境。同(tong)時，間充(chong)質干(gan)細(xi)(xi)胞具(ju)有(you)來(lai)源方便(bian)，易于分離、培養、擴增和純(chun)化，多次傳代擴增后仍具(ju)有(you)干(gan)細(xi)(xi)胞特性，不存(cun)在(zai)免疫排(pai)斥的(de)特性。正是由于間充(chong)質干(gan)細(xi)(xi)胞所具(ju)備的(de)優點，使(shi)其在(zai)治療多種疾病中具(ju)有(you)廣(guang)闊的(de)臨床應用(yong)前景(jing)。

方法(fa)簡介(jie)

江(jiang)苑(yuan)生物實驗室分離的人(ren)臍帶間充(chong)質(zhi)干細(xi)胞(bao)采(cai)用組織貼塊(kuai)法制(zhi)備而來，細(xi)胞(bao)總(zong)量約為1×10⁶ cells /T25瓶(ping)。

質量檢測

江苑生物(wu)實(shi)驗室分(fen)離的人臍(qi)帶間充質(zhi)干(gan)細(xi)胞(bao)經測試，具有的增(zeng)殖和分(fen)化潛能，可分(fen)化為成(cheng)骨(gu)細(xi)胞(bao)、脂肪細(xi)胞(bao)、軟骨(gu)細(xi)胞(bao)等。流式檢(jian)測結果顯示，HLA-DR、CD34、CD45陰性(xing)（<5%）；CD90、CD105、CD73陽性（>90%）。且不含有(you)HIV-1、HBV、HCV、支原體、內毒素、細菌、酵母和(he)真菌等。

運輸和保存(cun)

1．1 mL凍存管(guan)包裝干冰(bing)運(yun)輸，收貨后(hou)-80℃冰箱(xiang)保存(cun)過夜后轉(zhuan)入液氮(dan)或直接復蘇。若發(fa)現干冰已經揮(hui)發(fa)干凈、凍存(cun)管蓋脫落、破損及細胞有污染，請(qing)立即與我們聯系。

2．T25瓶培養的細胞(bao)常溫發貨，收到后按照細胞(bao)接(jie)收后的處理方法(fa)操作。

培養瓶細胞接收后的處理

1．收到細胞后，75%酒精消毒(du)瓶壁，拆下(xia)封(feng)口膜，放入(ru)37℃，5%CO₂培養箱(xiang)中靜置(zhi)3-4 h，以(yi)穩定細(xi)胞狀態。若發(fa)現培養(yang)瓶破損、有液體溢出及細(xi)胞有污染，請拍照后及時聯系我們。

2．請在顯(xian)微鏡下確認細胞狀態，同時(shi)給剛收到的細胞拍照(zhao)10倍和(he)20倍各2-3張以(yi)及(ji)培養瓶外觀照(zhao)片一張留(liu)存(cun)，作為(wei)售后依據(ju)。

3．細胞收貨脫落：若(ruo)細胞在快遞運輸途中因振(zhen)動(dong)脫落，先將培養(yang)瓶放入37℃，5%CO₂培養(yang)箱中靜置3-4 h，讓少數(shu)脫落的(de)細胞可再附著生長。若仍有(you)脫落聚集(ji)的(de)細胞，則 (1) 收集(ji)所(suo)有(you)細胞懸液，1000 rpm離心5 min，保留沉淀；(2) 添加0.25%胰蛋白酶(mei)消化液0.5 mL至離心管中，重(zhong)懸(xuan)沉淀，置于37℃消化2 min左右；(3) 向離心(xin)管內(nei)加(jia)入5 mL完(wan)全(quan)培(pei)養基終止消(xiao)化；(4) 1000 rpm，離心5 min，丟(diu)棄上清，用5 mL完全(quan)培養基（補加1-5% FBS，促進貼壁）重(zhong)懸沉淀，接種于新的(de)培養瓶(ping)內；(5) 待細胞完(wan)全貼壁(bi)后(hou)，培養(yang)觀察；之后(hou)按(an)照換液(ye)頻(pin)率更換新鮮(xian)的(de)完(wan)全培養(yang)基。

4．收貨細(xi)胞的培養(yang)和傳代(dai)：在顯微鏡下觀察細(xi)胞生長狀態，若細(xi)胞生長密度(du)在60%以下，可去除培(pei)(pei)養瓶中灌液培(pei)(pei)養基，加(jia)入新配制的(de)完全培(pei)(pei)養基，放(fang)到細(xi)(xi)胞培(pei)(pei)養箱中繼續培(pei)(pei)養。若細(xi)(xi)胞生長密度達80%-90%以(yi)上(shang)，可以(yi)對細胞進行(xing)傳(chuan)代處理。

5．運輸(shu)用的(de)培養(yang)(yang)(yang)基（灌液培養(yang)(yang)(yang)）不能再用來培養(yang)(yang)(yang)細胞，請換用合適的(de)新鮮培養(yang)(yang)(yang)基來培養(yang)(yang)(yang)細胞。

凍存細胞接收后(hou)的處理

收貨后-80℃冰箱保存過夜(ye)后轉入液氮(dan)或直接復蘇。

細胞復蘇：將含有1 mL細胞懸液(ye)的(de)凍存管(guan)置于(yu)37℃水浴(yu)中(zhong)迅速搖晃(huang)解(jie)凍，回溫(wen)后噴以(yi)75 %酒精并(bing)擦拭之，移入無菌操作(zuo)臺內。將凍存管(guan)中(zhong)細(xi)胞加入到(dao)含4-6 mL完全培養基的(de)離心管中混(hun)合均勻。1000 rpm離心3-5 min，棄去上(shang)清液(ye)，完(wan)全培(pei)養(yang)(yang)基(ji)重懸(xuan)(xuan)細(xi)胞。然后將細(xi)胞懸(xuan)(xuan)液(ye)加入培(pei)養(yang)(yang)瓶/培(pei)養皿中，培(pei)養箱中孵育。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

培養信息

培養基：10% FBS、DMEM/F12、1% Penicillin-Streptomycin

換(huan)液頻(pin)率：每2-3天換(huan)液一(yi)次。

組織來源：人(ren)臍帶

生長特性：貼壁(bi)生長

細胞形態：成纖維細胞樣

傳代特性：可傳5代左(zuo)右；3代以內狀態更佳

消(xiao)化(hua)液：0.25%胰(yi)蛋白酶(mei)，37℃消化2 min左右；1：3-5傳代

培養條(tiao)件：氣相：空(kong)氣 95%，CO₂ 5%；溫度：37℃

人臍帶間充質干(gan)細胞(bao)體(ti)外培(pei)養周期有限，建議您收到(dao)細胞(bao)后(hou)盡(jin)快進行相(xiang)關實(shi)驗

注意事(shi)項(xiang)

1．本(ben)細(xi)胞僅用(yong)于(yu)科學研(yan)究，不得用(yong)于(yu)臨床治療。

2．請注意(yi)無菌(jun)操作(zuo)，避免污染。